【摘要】目的  研究硫化氢(H2S)对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血糖和胃动力的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为实验组和对照组.实验组采用腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)建立糖尿病模型;对照组注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.成模后将实验组大鼠随机分为DGP组、DGP+H2S组.DGP+H2S组腹腔注射硫氢化钠(14umol/kg/d),对照组和DGP组注射等量的生理盐水,共10周.每4周测一次血糖和体重,实验前再测血糖、体重,并用美兰残留率测胃动力.结果 造模后实验组血糖水平和美兰残留率明显高于对照组,而10周时,DGP+H2S组的血糖水平明显低于DGP组,但两组美兰残留率没有明显区别.结论 H2S能够降低DGP大鼠的血糖水平,但是对胃动力没有明显影响.
　　【关键词】 硫化氢 糖尿病胃轻瘫 血糖 胃动力
　　糖尿病胃轻瘫(DGP)是糖尿病常见的并发症,临床常见有早饱、腹胀、嗳气、恶心、呕吐等胃动力不足的症状.硫化氢(H2S)是继NO,CO以后发现的第三种气体信号分子.科学家于1989年成功检测到脑内游离的H2S.生物体内可以通过胱硫醚-γ-裂解酶(CSE) 和胱硫醚-β-合成酶(CBS) 两条途径分解半胱氨酸形成.研究发现CBS和CSE在人体大多数组织中表达,其中在脑、心、肠道等表达较多.H2S参与机体很多的病理生理过程,本实验主要研究H2S对DGP大鼠血糖和胃动力的影响.
　　1 实验材料
　　1.1实验动物 健康雄性Wistar大鼠24只,由郑州大学实验动物中心提供,体重大约180g.
　　1.2试剂及器材 链脲佐菌素(STZ):Sigma公司产品;硫氢化钠:Sigma公司产品;罗康全优越型血糖仪:德国罗氏诊断有限公司生产;罗康全优越型血糖试纸:Sandhofer Str.116,68305 Mannheim,德国生产;美兰:广州化学试剂厂;721分光光度计:上海精科分析仪器;
　　2 实验方法
　　2.1建立糖尿病模型 将24只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,测量血糖和体重.实验组一次性注射STZ(60mg/kg,ip)建立糖尿病模型;对照组注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mmol/L,pH=7.4).3天后,尾静脉采血,测血糖,以≥16.7mmol/L为造模成功.
　　2.2给药处理 造模成功后,将实验组大鼠随机分为DGP组(n=8)、DGP+H2S组(n=8).DGP+H2S组注射硫氢化钠(14umol/kg/d,0.2ml,ip),共10周,对照组和DGP组注射等量生理盐水.
　　2.3实验操作 造模后,观察大鼠的一般情况,每4周测一次血糖和体重,实验前再测.然后分别将美兰溶液(1mg/ml,0.4ml)灌胃,30min后处死,取出全胃,用4ml生理盐水冲洗胃内残留物并收集,用离心机以3500r/min,离心15min,取上清液,用721分光光度计在640nm波长处检测吸光度值(OD).胃内色素残留率=测定管OD值/标准管OD值×100%.胃动力用胃内色素残留率表示.
　　3 统计学处理
　　所有数据均采用均数±标准误表示,用Sigma统计软件对数据进行分析,采用t检验进行统计学处理,以P<0.05为显著性差异界值.
　　4 结果
　　4.1动物一般情况
　　对照组大鼠一般状况良好;DGP组和DGP+H2S组在造模后3天开始出现多饮、多尿、多食.
　　4.2体重和血糖变化
　　第10周时,DGP组和DGP+H2S组大鼠体重明显低于对照组,而血糖浓度明显高于对照组(P<0.01);与DGP组相比较,DGP+H2S组的体重明显增高,血糖浓度明显降低(P<0.05).
　　表一:H2S干预10周时三组大鼠体重和血糖的变化
　　体重(g) 血糖浓度(mmol/L)
　　对照组 381.429±13.702 4.886±0.0508
　　DGP组 158.571±12.234* 34.171±0.6990*
　　DGP+H2S组 228.571±30.428*# 15.343±3.6010*#
　　与对照组相比,*p<0.01;与DGP组相比,#p<0.05
　　4.3大鼠胃内色素残留率 DGP组和DGP+H2S组胃内美兰残留率明显高于对照组(P<0.01),但DGP组和 DGP+H2S组相比较没有明显差别.
　　表二:三组大鼠10周时胃内色素残留率的比较
　　胃内色素残留率
　　对照组 39.483±1.263
　　DGP组 52.950±0.799*
　　DGP+H2S组 52.050±0.945*#
　　与对照组相比,*P<0.01;与DGP组相比,#P>0.05
　　5 讨论
　　糖尿病是一种常见的代谢性内分泌疾病,其发病率逐年增高,而DGP又是一种常见的慢性并发症,伴有胃动力障碍.大量的研究表明H2S能够调节糖尿病过程.如:内源性硫化氢可抑制糖尿病肾病大鼠肾脏组织中细胞外基质的过度积聚,延缓糖尿病肾病的病理改变.本实验表明H2S能够在一定程度上对抗糖尿病引起的体重减轻和血糖升高效应.通过胃内色素残留率的测定表明DGP组和DGP+H2S组存在有明显的胃动力障碍,H2S对糖尿病的胃轻瘫没有明显改善作用.这是不是和H2S剂量较低有关,在以后的实验中我们将进一步验证.
　　参考文献
　　[1]龙庆林,房殿春,史洪涛,等.胃Cajal间质细胞在糖尿病胃轻瘫中的作用[J].重庆医学,2005,34(8):1159-1161.
　　[2]黄雯,李晓璐,等.内源性H2S对糖尿病肾病细胞外基质积聚的作用[J].首都医科大学学报,2009,30(2):133-136.